无菌体液

答：①症状指征：寒战、发热或体温过低（≥38℃或≤36℃）、皮疹（黏膜出血）、肝脾肿大、关节疼痛、神志昏迷或休克（血压降低）。实验室检查指标：白细胞总数过高过低（≥10.0 × 1

答：骨髓培养和血液培养的送检指征是基本一致的。当患者高度考虑为血流感染，但外周血培养连续多次阴性时可以考虑做骨髓培养。尤其是骨髓炎、慢性伤寒、布鲁菌病、艾滋病、长期

答：与采集样本的时间、部位、标本量、采集样本次数、样本的运送、样本的储存及患者用药情况、培养基与检验方法的选择等有关，因此应严格把握每种因素的最佳条件以提高阳性检出

答：患者出现寒战，体温升高之前；使用抗菌药物之前，应立即采集血液作培养（心内膜炎例外）。如因病情需要不能暂时停止使用抗菌药物时，或者患者无明显寒战时，应在第二次用药前采血，因为此

答：对于发热原因不明，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先从不同体位采集2～3次（一次静脉采血注入多个培养瓶中应视为单份血培养）血标本，其间隔最好在5分钟内。24～36小时后，估计体温升高之

答：在寒战后或发热前采集血液或骨髓标本最易获得阳性。此外，通常可在24小时内采集3～4次血标本。

答：感染沙门菌的患者由于不同病程时期，病原体在患者体内存在的部位不同，排出的途径也不同，所以应根据病程采集不同标本进行细菌培养才能提高培养的阳性率。发病早期（第1～2周），由于菌

答：①怀疑急性心内膜炎时应在抗生素治疗前1～2小时内分别从三个不同部位（最好是肘动脉、股动脉）采集3份血标本，分别进行培养；②怀疑亚急性细菌性心内膜炎时，应在抗生素治疗前，于1～2小

答：因为分枝杆菌感染初期以及活动期时，容易发生淋巴-血流播散，所以在结核症状出现初期，当有咳嗽、咯血、潮热盗汗等典型症状时，采集血液标本，检出阳性率较高。另外，发生肺外结核，如

答：因为螺旋体侵入人体后，约经一周潜伏期，可大量出现于血液内，患者在持续发热一周后可消退，血中螺旋体可消失，间歇1～2周后，患者会再次发热，血液中可再次出现螺旋体，所以选择在发热期采

答：菌血症的临床症状可分暂时性（一过性菌血症transient）、间歇性（多次一过性菌血症intermittent）及持续性菌血症（continuous）。了解菌血症的临床症状是正确采集血液培养样本的关键

答：暂时性菌血症发生在感染组织（脓肿、疖及蜂窝织炎）外科术后、拔牙或其他口腔诊疗操作与手术后、膀胱检查、尿道扩张手术及插尿道导管、吸附流产、直肠镜检查后、纤支镜检查后

答：间歇性菌血症常发生于腹壁脓肿、化脓性胆管炎、肺脓肿，骨盆、肾周围、肝脏、前列腺等处的脓肿。其中腹壁脓肿、化脓性胆管炎、肾周围脓肿是间歇性菌血症的高发因素。间歇性

答：持续性菌血症为急性或亚急性细菌性心内膜炎及血管内感染（例如CRBSI，导管相关性感染）的主要特征。另外，持续性菌血症还见于伤寒及布鲁菌病的最初几个星期。生物恐怖烈性传染病

答：①血液循环中的细菌，有“暂时性”与“持续性”之分。多次采血可提高阳性检出率，减少漏检（尤其减少暂时性菌血症的漏检），因为一过性菌血症时，细菌仅在外周血

答：①严格执行“三步消毒法”：70%乙醇擦拭静脉穿刺部位待30秒以上；碘酊作用30秒或碘伏作用90秒以上，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径3cm以上；70%乙醇脱碘待干。对

答：当高度怀疑血流感染或者慢性血流感染时，以及伤寒后期，或布鲁菌病时，推荐进行骨髓培养。采集过程应严格无菌操作，按照标准骨穿程序，采集骨髓后应马上就地注入血培养瓶中。为避免

严格做好患者抽血部位的无菌操作技术，避免被体表或腔道正常菌群污染； 不要与其他项目的取血同时进行； 穿刺点消毒严格执行“三步消毒法”，消毒剂不要使用低效消毒剂；

答：血培养的阳性率直接与采血量密切相关，据Mermel和Maki报道每增加1ml血样本可使血培养阳性率上升3%，所以采血量要足够。通常采血量与培养基（肉汤）之比以1∶5～1∶10（V/V）为宜，成人一

答：当发生菌血症时，成人血液中的菌量往往小于1CFU/ml，而儿童菌血症血液中的菌量常超过100CFU/ml，所以婴幼儿、儿童采血量可以少于5ml。

答：①成人：1～2小时内在不同部位采集2～3套（两瓶需氧或需氧加厌氧瓶为一套）血培养，每套血量不低于20ml。对于成年患者的血培养，只采集一瓶是不允许的，因为一瓶血培养标本的阳性结果很难

答：①根据各类血培养基的用途不同，正确选择科学搭配不同的培养基，一般推荐每份标本至少使用两瓶，需氧和厌氧各一瓶，以防漏检。②当室温不超过30℃时，少量培养瓶可直接室温避光存放

答：血液标本采集后的血培养瓶如果不能立即送到细菌室，自动化血培养仪配套的血培养瓶需室温保存，手工操作使用的培养瓶（如双相培养瓶）置35～37℃孵箱中，切勿冷藏。有些苛养菌如流感嗜

室温过高对使用自动化血培养系统配套的血培养瓶采集的血培养，在不能立即送检时，会造成什么影响？答：一般情况下放20～22℃，不放冰箱或35℃，培养结果不会受影响。而在炎热的夏天室温可

答：①注入标本后的血培养瓶应立即送至临床细菌室，如因某些原因不能立即送检，应将已接种血液的培养瓶置于室温保存，保存时间小于1天，切勿置于冰箱冷藏；②采样后的血培养瓶在送往细

答：①检查培养瓶是否有渗漏、破裂或明显污染；②检查瓶子上的标签或条码与申请单是否相符；③通过刻度检查血量是否充分或超量，对采血量不合格的血培养加以注明，并及时反馈临床；④对

答：①拒收：当血培养瓶上未贴标签或条码，或标签条码与化验申请单不符时，或血培养瓶内血液凝固、培养瓶破裂，或有明显污染时。此时应立即与临床联系，说明拒收理由，并在送检人员的交接

置恰当容器中小心转运，防止倾倒摔碎。如不小心摔碎培养瓶，按照生物安全突发事故应急预案执行，进行必要的消毒隔离。血培养瓶处理：①传统手工法血培养每天早、晚观察两次，每次观察

答：①传统单纯液体血培养瓶主要为静置培养，在未振摇前通过观察瓶内是否有絮状物、均匀混浊、溶血、凝块、液体表面是否产生菌膜、底部血细胞与液体交界处是否有白色颗粒形成、

答：①取一滴液体生长物直接涂片湿片镜检，以观察细菌的形态及其存在情况。取瓶中液体培养物涂片革兰染色，以确定细菌的形态及其类型，必要时采用其他染色方法染色。将观察结果及时

答：①培养环境不当，如缺乏二氧化碳、厌氧或微需氧生长条件；②缺乏被检菌生长的特殊营养物质；③转种培养时间不够长，有些生长缓慢的细菌容易被漏检；④存在抗菌药物；⑤无微生物存在，若

答：革兰染色未找到细菌的阳性血培养瓶，补充吖啶橙染色检查弯曲菌和布鲁菌，发现阳性者使用特殊培养基进行分离培养。未发现阳性，仍需盲种厌氧和需氧血平板，然后继续将培养瓶放入仪

答：由于受方法学限制，革兰染色法不能直接检测到血液中含有的少量微生物（小于1CFU/ml），所以不提倡对血液标本做直接涂片革兰染色。

导管微生物定植（localized catheter colonization）：微生物在导管尖端、皮下段或者体外端显著生长，定量超过100CFU或半定量培养超过15CFU； 穿刺点感染（出口部位感染，插管部位感染）（ex

答：①BSIs（bloodstream infections）：血流感染；②CRBSI（intravascular catheter-related bloodstream infections）：血管内导管相关性血流感染；③CVCs （central venous catheters）：中心静

答：CRBSI的发生率与导管种类、导管相关医疗操作的频率、患者病情（如基础疾病、疾病严重程度等），以及导管留置部位被污染的机会的高低等因素均有关。对于短期留置的血管内导管，皮

答：①用75%乙醇清洁导管周围皮肤；②无菌手续移动导管，剪取导管尖端5cm，直接置入无菌容器中；③立即送至微生物学实验室，注意防止干燥。操作过程如下图所示。血管内导管尖端培养标本

答：①Maki半定量培养法：用无菌镊子将5cm导管在9cm血琼脂平板上“Z”字形滚动4次，然后弃之，CO2培养箱35℃过夜培养，如血琼脂平皿上生长> 15个菌落，提示可能存在CRBSI。②

答：①只有在做外周血培养的同时，做血管内导管尖端培养，才能确定患者菌血症的来源；②当外周血培养和导管尖端培养结果相同时，可以认为导管是患者菌血症的源头。

答：由于增菌可放大污染，致使培养结果无法解释，故不予推荐。目前常用的培养方法有：①Maki半定量法：阳性标准≥15CFU；②定量法：采用振荡法、超声洗脱法，阳性标准> 100CFU。该方法更

答：①导管培养、导管内血培养、外周血培养为同一种菌；②有败血症症状、治疗效果不好、但拔除导管后情况即可改善；③外周血∶导管血≤1∶10；④导管内血报阳时间比外周血早2小时

对非隧道式、隧道式的中心静脉导管、静脉留置口（VAP）可疑有CRBSI的患者推荐的培养方法？结果的解释？答：①培养方法：经外周静脉穿刺采血≥1套；从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套；二

答：培养方法：推荐Maki半定量培养法；结果解释在前面已经叙述。

答：①症状指征：发热等感染性全身性症状；颅内压升高症状：头痛，喷射性呕吐，小儿前囟饱满等；脑膜刺激症状：颈项强直；神经麻痹征；脑脊液的变化：压力上升，混浊不清，含大量脓细胞，蛋白增多，糖减少

答：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最好是在应用抗生素之前采集脑脊液。

答：脑脊液标本的采集由临床医生进行，行穿刺术采集。脑脊液的穿刺部位较多，有腰椎穿刺、小脑延髓池穿刺，婴儿时期的前囟门作侧脑室穿刺等。因腰椎穿刺简单易行且危险性小，最为常用

答：对疑有颅内出血、血栓形成，以及栓塞不能鉴别者。有剧烈头痛、呕吐、视神经乳头水肿等颅内压显著增高的病例，为了避免脑疝形成，一般慎做或禁做腰穿，必须做时亦不可放液过速、过

答：①最好在抗生素治疗前采集标本；②穿刺过程中要严格无菌操作，防止污染；③如果只采集了1管脑脊液，应首先送到细菌室；④采集脑脊液的试管不需要加入抗凝剂或防腐剂；⑤做脑脊液培养

答：因为脑脊液中常见的致病菌有脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌，这些细菌属苛养细菌，对生长条件要求较高，且在离开机体时间过长后，细菌可能因为不能适应外部环境而死亡。同时上述细菌因

答：脑脊液中常见的病原菌，如脑膜炎奈瑟菌，对外界环境抵抗力低，对寒冷和干燥均敏感，如果不注意，病原菌可能死亡，导致培养假阴性。所以脑脊液标本送检时应注意保温（25～37℃），防止干燥，并避

答：脑脊液如果用于检测病毒，脑脊液标本应在运送标本管的容器中放入冰块，15分钟内送到实验室。

答：①检查盛装脑脊液的容器是否有渗漏、破裂或明显污染；②检查盛装脑脊液的容器标签与申请单是否相符；③检查脑脊液标本是否达到最低检验量（不少于1ml）。

答：①当盛装脑脊液的容器上未贴标签，或标签与化验申请单不符，或盛装脑脊液的容器破裂或明显污染时，细菌室应拒收培养标本。处理方法：立即与临床医师联系，报告拒收的具体理由。②寒

首先肉眼观察脑脊液外观的颜色、是否混浊等。 实验室接到脑脊液标本时应尽快涂片镜检作细胞计数。若脑脊液标本明显红色或混浊，无须计数和分类，直接涂片革兰染色镜检，根据镜检

答：不一定，有经验时，暗视野都能准确辨认。此外，还可以用优质碳素墨水、优质的黑钢笔水或卢戈碘液，但用卢戈碘液时应尽快观察，否则易褪色。

答：根据WHO公布的历年来的脑脊液病原体排名，依次为脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、荚膜型大肠埃希菌（K抗原高表达）、新型隐球菌。所以，脑脊液沉渣的培养需要选用血琼脂

答：CHROMagar与SDA是最常用的真菌培养基，无论是念珠菌属、隐球菌属，还是双相真菌均可生长。新型隐球菌是嗜神经性真菌，比其他真菌更容易感染中枢神经系统。首代培养温度宜用35℃

答：只有在脑脊液中淋巴细胞增多，脑脊液生化氯降低、蛋白质升高时才对脑脊液标本进行分枝杆菌的培养。尤其是脑脊液经过室温过夜放置后，表面形成一层膜结构时，往往提示有结核存在

答：一般情况下，脓性脑脊液取沉渣接种即可，无需增菌。确认为化脓性脑膜炎的患者，有时需要多次采集脑脊液评价治疗效果。对经过治疗后的脑脊液可以增菌，但普通成人血培养瓶不能使用

答：有利于某些娇嫩细菌（如脑膜炎双球菌）的生长；保持培养基表面干燥，防止细菌在液滴中形成弥散状生长，便于形成单个菌落；防止培养基污染。

答：对于申请单有特殊要求的按照申请单要求执行，例如结核菌培养选用大气或者5% CO2环境，35℃，为避免培养基干燥，相对湿度不得低于50%；真菌培养，由于脑脊液中最常见的是隐球菌，故而选

答：没有CO2培养箱同样可以做CO2培养，有两种方法：①商品可获的厌氧盒和CO2发生剂：把需CO2培养的平板放入厌氧盒，弃去发生剂外包装，立即放入已装平板的厌氧盒并立即盖好厌氧盒的盖，密

答：厌氧菌很少引起脑膜炎，因此不需要对脑脊液常规进行厌氧培养。当患者有各种颅内脓肿，以及血培养分离到专性厌氧菌时，可以考虑厌氧培养。

答：多有结核病史，起病缓慢，早期有低热乏力、精神不振、食欲减退、头疼加重、恶心、呕吐等症状。

答：将无菌操作收集的脑脊液置冰箱或室温过夜，待表面薄膜形成后将薄膜接种到罗氏培养基，或将脑脊液转移至带塞无菌试管中，3000r/min离心30分钟，取沉淀直接接种，最好再加种一个分枝

答：多伴有胸痛、发热、胸腔积液（根据抽出的液体的外观分为混浊、乳糜性、血性或脓性）。

答：①结核性胸膜炎；②细菌性肺炎引起的胸膜炎；③真菌感染引起的胸腔积液；④胸腔积脓。

答：①结核性腹膜炎；②肝硬化腹水合并感染；③胃肠穿孔；④盆腔积脓；⑤腹壁脓肿。

答：当检查出患者有胸腔或腹腔（盆腔）积液/积脓时，应在抗菌药物治疗之前采集标本。

答：①无菌操作穿刺抽取标本或外科手术过程中采集标本；盆腔积脓、腹壁脓肿、胸腔积脓，采集脓性胸腹水时，需在超声波或者X线的引导下进行；②标本采集量应一般为5～10ml，不能用拭子蘸取

答：①安置胸腔或腹腔引流管的患者，禁止使用胸腔或者腹腔引流液替代经皮穿刺获得的标本；②标本的采取一定要严格地履行无菌操作技术，注意防止污染；③标本与抗凝剂的比例一般为1∶1

答：漏出液为淡黄色、稀薄、透明状。渗出液可呈不同的颜色或混浊，血色可能为结核、肿瘤等。黄色脓性见于化脓性细菌感染。漏出液细胞较少，每微升常在100个以下；渗出液细胞较多，每

答：感染损伤局部组织，内源性与外源性炎症介质刺激导致肥大细胞脱颗粒，组胺释放使毛细血管通透性增加，液体漏出。白细胞在炎症介质的趋化效应下浸润到组织间隙，血液中的纤维蛋白也

答：发出臭味常是厌氧菌感染的标志。

答：腹部有积液伴腹痛、呕吐、肌紧张、肠鸣音弱或消失等症状。

答：①原发性腹膜炎：腹腔内无原发病灶的急性腹膜的广泛性细菌性炎症；②继发性腹膜炎：由各种腹腔内脏器官病变或外伤所继发的腹膜急性炎症。

答：一般胸腹水标本采集后常温15分钟内应送至微生物室，若注入血培养瓶内，可适当延长保存时间，但保存不应超过24小时。若做真菌培养需4℃保存。

答：胆汁（bile）是由肝细胞分泌的一种液体，通过胆道系统流入胆囊，循胆总管入十二指肠。正常人每天平均分泌胆汁300～700ml。人胆汁呈黄褐色或金黄色，黏性，有苦味。从肝处分泌的胆汁称肝

答：正常情况下胆汁是无菌的。在胆汁内发现的细菌被认为是来自门静脉或直接从肠道经Oddi括约肌反流入胆道，因此，肠道细菌易位被认为是胆道感染发生的主要原因。而胆道疾病导致胆

答：腹痛、黄疸、右上腹压痛、肌紧张、胆囊区深吸气时有触痛，即墨菲（Murphy）征阳性、中毒或休克，常伴有恶心、呕吐、发热、尿少且黄。

答：疑有胆石病伴感染者、急性胆囊炎、慢性胆囊炎、肝胆系统感染、伤寒带菌者等。

答：用于培养的胆汁只能在手术过程中采集。经胆总管引流出的胆汁由于受肠道细菌的影响，不能用于培养。

答：胆汁采集的方法有3种，即十二指肠引流法、胆囊穿刺法及手术直接采取法。①十二指肠引流法：十二指肠引流液（duodenal fluid drainage）包括十二指肠液（D液，无色或淡黄色，透明或微混）

答：胆汁标本采集容易污染，为避免污染菌繁殖造成假阳性，胆汁标本采集后应在常温下15分钟内送至实验室，否则应保存于4℃冰箱中。

答：一般细菌涂片检查将标本经3000r/min离心30分钟，弃去上清液，取沉渣涂成均匀的薄膜。若穿刺液呈红色，应在沉渣中加入等量无菌蒸馏水破坏红细胞后，再离心沉淀，取沉渣涂片。然后进

答：①直接涂片湿片镜检：由于临床送来的胆汁并非一定按照标准要求采集，所以必须采用直接湿片法进行样本合格性筛查。外观墨绿色透明黏稠为正常的胆囊胆汁；当送来的胆汁为金黄色时

答：外观脓性标本直接接种，胸水与盆腔积脓接种血琼脂、巧克力琼脂及麦康凯，腹水接种血琼脂、麦康凯。非脓性标本先注入血培养瓶内增菌，报阳后再转种上面的固体培养基，经35℃ 18～24

答：需要注意的是，只有经过筛选合格的，考虑为感染的胆汁才需要接种、培养。只有穿刺获得的胆汁能用于培养，肝胆术后安置的T管中引流出来的引流胆汁不能用于细菌培养。胆汁普通需

答：正常人胆囊中的胆汁是无菌的。胆道感染患者的胆汁中，主要为革兰阴性杆菌，但混合感染也不少见。手术过程中直接穿刺胆囊获得的胆汁，如有细菌生长，可认为是感染菌。经十二指肠引

答：肠道细菌易位，在胆道生长繁殖，成为胆道感染及胆囊结石的诱因。而胆汁、抗菌药物、机体免疫因素等常常可诱导细菌丧失细胞壁而成为L型，L型细菌在胆汁的高渗环境下能生长繁殖，从

答：①发冷、发热、心悸、出汗、乏力及精神症状；②心前区疼痛，心包摩擦音；③心音明显减弱，有肺实变体征，可出现心脏压塞征象；④心电图改变：普遍导联ST-T改变或肢导低压。

答：①结核性心包炎；②风湿性心包炎；③细菌或病毒引起的急性非特异性心包炎。

答：关节肿胀疼痛，关节周围肌肉发生保护性痉挛，严重时出现全身寒战与高热，局部温度增高。

答：化脓性关节炎：多见于儿童及青少年，好发部位为髋关节及膝关节。

答：患者某侧睾丸急性发作的疼痛，并向腹股沟部放射，自觉局部肿胀、发热、全身症状较轻，但有时体温可达40℃，无泌尿系统感染特征。

答：急性睾丸炎：最常见的致病因素为非特异性急性睾丸炎。

答：心包液、关节液和鞘膜积液标本的采集方法同胸水，穿刺采集。但采集量为1～5ml。

答：心包液、关节液和鞘膜积液标本中容易出现苛养菌，尤其当怀疑为淋菌性关节炎的患者的关节液采集后应立即送检，注意保温运送，不能置于4℃冰箱保存。

答：同胸腹水。脓性标本直接接种，非脓性时先增菌。