曲霉菌抗原和抗体测定

答：半乳甘露聚糖（galacto-mannan，GM）是曲霉细胞壁上的一种多聚抗原，其中具有免疫反应性的是呋喃半乳糖，菌丝生长时能从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的真菌抗原。GM释放量与菌量成

答：国内外的荟萃分析结果表明，其诊断的灵敏度和特异性均高达90%左右。患者血清中GM含量与感染程度相关，动态监测血清GM水平的变化可作为病情转归和疗效评价的指标。在治疗期间，

答：GM试验和G试验发生假阳性的人群不同。GM试验在巨细胞病毒血症、铜绿假单胞菌和化疗后金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌感染者血清中会出现假阳性，但这些患者G试验则为阴性；而出

答：目前，商品化的曲霉菌半乳甘露聚糖抗原检测试剂盒较少，国外产品有伯乐（Bio-Rad）公司生产的Platelia™ Aspergillus EIA试剂盒；国内产品只有天津贻诺琦（Bio-Enoche）生物工程有

答：伯乐（Bio-Rad）公司Platelia™ Aspergillus EIA试剂盒原理：该试剂盒采用一步夹心法，待检血清（或血浆）中的半乳甘露聚糖与包被在酶标板上的鼠单抗（捕获抗体）及辣根过氧化物酶标

答：半乳甘露聚糖定量检测试剂盒与定性试剂盒相比不但可以进行定性分析，还可对半乳甘露聚糖精确定量，有利于判断患者侵袭性曲霉感染的严重程度。此外，半乳甘露聚糖含量的动态监测

答：上述国产半乳甘露聚糖ELISA试剂盒分析灵敏度0.1ng/ml；特异性达89%；测范围为0.1～10ng/ml；与Bio-Rad公司Platelia™ Aspergillus EIA检测试剂盒进行对比试验（109例样本），阳性

答：标本可以是血清、尿液、脑脊液及肺泡灌洗液（BAL）等，但敏感性和特异性有所不同。

答：血清或血浆标本均需要预处理。标本与处理液混合后加热，可以：①将标本中的抗原-抗体复合物解离，有利于抗原检测；②将标本中的蛋白质变性并沉淀，减少其对免疫测定的干扰。

答：在离心管中加300µl待检血清或血浆，再加入100µl样本处理液，漩涡振荡10秒混匀，将离心管放入水浴锅内100℃加热90秒后10 000g离心10分钟，取上清即可进行检测。

答：为消除系统误差和保证试验的准确性、可靠性，每次试验都必须做标准曲线和阴性、阳性质控，并在质控品不失控的前提下才能进行数据分析。

答：抗菌药物如哌拉西林、他唑巴坦、阿莫西林、克拉维酸等与GM有交叉反应，因此在接受这些药物治疗的患者中GM试验的特异性可能会下降。GM试验的假阳性率为10%～15%，一般在以乳制品

答：GM检测对中性粒细胞减少患者感染曲霉的诊断价值较高，但对儿童、肿瘤及ICU危重患者、中性粒细胞不减少或减少不严重的其他IA高危人群诊断价值有限。对此现象的解释是由于中

答：需要使用的仪器包括：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、离心机、水浴锅、混旋器等。

答：曲霉抗体的研究没有念珠菌抗体那么广泛和深入。Latgé等研究小组报道，约1/2的IA患者产生曲霉特异性抗体。Sambatakou等进一步证明，抗体测定对非中性粒细胞减少的亚急

答：商品化的曲霉菌抗体检测试剂盒，国外产品有伯乐（Bio-Rad）公司生产的Platelia™ Aspergillus IgG抗体检测试剂盒，德国Virion Serion公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒

答：曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒（ELISA）原理相同，均采用ELISA间接法。将预处理后的患者血清（或血浆）样本加到包被有曲霉菌抗原的酶标板中，血清（或血浆）中的曲霉菌IgM或IgG抗体与固相

答：上述国产曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒分析灵敏度分别为8AU/ml、31.25AU/ml；特异性均大于90%；测范围分别为8～64AU/ml、31.25～500AU/ml；与德国Virion Serion公司IgM抗体检测试剂

答：样本处理的目的是去除类风湿因子的干扰。类风湿因子是一种以变性IgG为抗原的自身抗体，主要为IgM型。进行IgM抗体检测时，它的存在会导致假阳性结果。此外，结合力强的病原体特

答：目前，尚无曲霉菌IgM和IgG的国际标准品和国家标准品，根据1995年国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）和国际临床化学和实验室医学联盟（IFCC）推荐的“临床实验室物质特性和单位命

答：需要使用的仪器包括：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、离心机、混旋器等。

曲霉菌抗原抗体联合检测方案

答：新型隐球菌临床表现、脑脊液常规、生化检测及头颅影像学检查均缺乏特异性，与其他颅内感染性疾病尤其是结核性脑膜炎难以鉴别，误诊率高，确诊只能依赖于病原菌的检出。诊断新型

答：欧洲癌症研究和治疗组织和美国真菌病研究组（EORTC/MSG）已经把荚膜多糖作为诊断隐球菌病的标准之一。中国侵袭性真菌感染工作组经反复讨论，并参照EORTC/MSG有关标准，同样把血清

答：荚膜多糖定量测定具有诊断和预测价值。抗原的效价往往与疾病的程度密切相关，定量检测荚膜多糖浓度有助于判断感染的严重程度或疾病的活动程度。荚膜多糖含量的动态监测可作

答：血清、脑脊液、肺泡灌洗液和尿液均可检出荚膜多糖，但脑脊液敏感性高于血清和其他体液。

答：目前，商品化的新型隐球菌荚膜多糖抗原检测试剂盒国外产品有美国IMMY公司生产的LATEXCRYPTOCOCCUS ANTIGEN DETECTION SYSTEM（乳胶凝集法）和CrAg Lateral Flow Assay（胶体金法）；

答：国外产品乳胶凝集法试剂盒原理：该检测系统利用包被在乳胶颗粒中的抗隐球菌抗体与含有隐球菌荚膜多糖抗原的样本发生凝集反应，通过凝集颗粒的大小进行定性分析。贻诺琦（Bio-En

答：由于方法学不同，各种检测技术的灵敏度不同，依次为ELISA法>胶体金法>乳胶凝集法，ELISA法检测灵敏度可达0.5ng/ml，脑脊液和血清样本荚膜多糖抗原检测的敏感性可达到97%和87%。荚

答：上述国产荚膜多糖ELISA试剂盒分析灵敏度< 0.5ng/ml；特异性达99%；检测范围为0.32～32ng/ml；与美国IMMY公司新型隐球菌抗原检测试剂盒（乳胶凝集法）进行对比试验（166例样本），阳性符合率

答：需要使用的仪器包括：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、离心机、混旋器等。