消毒灭菌剂（设备）监测

：检验机构的微生物学实验室应采取封闭式布局，建筑应便于清洁、消毒。为避免污染应在相对正压洁净条件下进行，但有时因特殊需要，用致病菌作指示菌时，则应在生物安全柜（负压）内进行。

答：无菌操作的基本要求有如下10点：①试验开始前，应以湿式方法清洁台面和打扫室内地面，然后以紫外线或其他方法对实验室内空气进行消毒；②实验人员应穿戴工作服、口罩、帽子；进行无

答：高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103～206kPa时，温度可达121.3～132℃，蒸气穿透能力也随之增强，极大地提高了杀菌效果。高压蒸汽灭菌法

答：压力蒸汽灭菌器：根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器两大类：①下排气式压力蒸汽灭菌器灭茵原理：利用重力置换原理，使热蒸汽在灭

答：压力蒸汽灭菌适用范围：用于耐高温、高湿的医用器械和敷料物品的灭菌。不能用于凡士林等油类和粉剂的灭菌。

答：压力蒸汽灭菌：必须进行工艺监测、化学监测和生物监测。

答：压力蒸汽灭菌同其他消毒、灭菌方法一样，其灭菌能力受多种因素影响，如设备质量、蒸气质量、残留冷空气、物品包装或摆放不当等都可能影响到灭菌效果。为保证灭菌的成功，减少医

答：工艺监测：又称程序监测，按经过实验所确定的灭菌工艺和有关参数进行检查，以判断灭菌是否按照规定的条件进行。检查的主要项目有：物品的包装、物品的装放、排气情况、灭菌温度、

答：进行压力蒸汽灭菌化学监测可参考以下几点：①化学指示卡（管）监测方法：既能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间的化学指示管（卡）放入大包和难以消毒部位的物品包中央，经一个灭菌周期

答：化学指示剂监测是利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点，以判断是否达到灭菌所需参数。化学指示剂既表达了达到的温度，又表达了作用的时间，是一种较

答：预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器每日进行一次B-D（Bowie-DickTese）试验，检测灭菌器空气排除效果。具体做法是：采用专用的指示图，放入标准包内（包的大小为25cm × 25cm &time

答：高压蒸气灭菌生物监测使用嗜热脂肪杆菌（ATCC 7953或SSIK 31）芽胞制作生物指示剂，利用其具有耐热且为非致病性、本菌芽胞对热的抗力较强、其热死亡时间与病原微生物中抗力最强

答：指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC 7953或SSIK 31株），菌片含菌量为5.0 × 105～5.0 × 106CFU/片，在121℃± 0.5℃条件下，D值为1.3～1.9分钟，杀灭时间（KT值）≤

答：试验用培养基为溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。溴甲酚紫蛋白胨水培养基配制：蛋白胨10.0g，葡萄糖5.0g，溶于1000ml蒸馏水中，调pH至7.0～7.2，然后再加2%溴甲酚紫酒精溶液0.6mL，摇匀后

一、消毒试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成的。载体应根据消毒对象选择，常用的有金属、玻璃、滤纸、线、棉布等。根据其特点选择适宜材料载体作为代表。载体可以为方

答：①用浊度计测定的菌悬液浓度，只用于在滴染菌片时对菌悬液稀释度的估计。作为菌悬液含菌浓度或菌片染菌量的正式报告（如杀菌试验中阳性对照组菌悬液或菌片所含菌量），必须以活菌

答：嗜热脂肪芽胞杆菌的抗热性很强，它能在80℃下生长，120℃下12分钟才可死亡，其耐高温的顺序为：芽胞>孢子>营养细胞和菌丝体。该菌最适宜生长温度为56～65℃，在35℃及以下温度条件基

答：将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别放入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。

答：一般将嗜热脂肪芽孢杆菌菌片放入无菌纸袋内，置于灭菌包中心，灭菌处理完毕后，在无菌条件下取出菌片，接种到专用溴甲酚紫蛋白胨水培养基内，于56℃条件培养2～7天观察结果，若培养基变

答：生物监测不合格时，应立即连续重做两遍试验，如均合格，只需分析前次不合格的原因，如仍有不合格，则需追溯召回上次监测合格以来的所有灭菌物品，重新灭菌。

答：干热是指相对湿度在20%以下的高热。干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。一般繁殖体在干热80～100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160～170℃经2小时方可杀死。干热灭菌包括：燃烧

答：①机械对流型烤箱：加热迅速易于控制，装载量大，使用时冷空气由空气入口进入，通过电热器加热后的空气被送入柜室，使柜室内温度迅速均匀地上升到160℃；②金属传导型烤箱：适用于小包

答：适用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品的灭菌；用于不耐湿热的器械的灭菌；用于蒸汽或气体不能穿透物品的灭菌，如玻璃、油脂、粉剂和金属等制品的消毒灭菌。

答：进行工艺监测、化学监测、生物监测。

：每年进行一次工艺监测。①检测方法：检测时，将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门，将导线引出，由记录仪中观察温度上升与持续时间。②结果判定

答：干热灭菌效果化学监测可参考以下几点：①检测方法：将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂3～5个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌

答：干热灭菌效果检测，应使用枯草杆菌黑色变种芽胞，不得使用嗜热脂肪杆菌芽胞，因在干热条件下，前者对干热的抗力较后者为强。枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽胞菌片。染菌载体（10mm &t

答：枯草芽孢杆菌黑色变种培养使用营养肉汤培养基。其配方如下：蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml。将各成分溶解于蒸馏水中，调pH至7.2～7.4，分装，于121℃压力蒸汽灭菌20

答：枯草杆菌黑色变种芽胞（ATCC 9372）在普通营养肉汤内生长良好，适宜生长温度为30～37℃，一般放在35℃普通培养箱内培养即可。

答：将枯草杆菌芽胞菌片分别装入灭菌玻璃平皿内（1片/皿）。灭菌器与每层门把手对角线内，外角处放置2个含菌片的平皿，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至80℃时，取出平皿。

答：灭菌完成后，在无菌条件下，从玻璃平皿内取出菌片，加入普通营养肉汤培养基内（5ml/管），以36℃± 1℃培养48小时，观察初步结果，无菌生长管继续培养至第七日。若每个指示菌片接种

答：检测所用的指示菌片需经卫计委认可，并在有效期内使用，每次监测必须设阳性对照。

答：无色易燃气体环氧乙烷又名氧化乙烯，在低温下为无色液体，具有芳香醚味，是含有一个氧杂原子的三元杂环化合物；环氧乙烷分子式C2H4O，沸点为10.8℃，嗅阈值为760～1064mg/m3，相对密度0.8

答：环氧乙烷是一种广谱、高效的气体杀菌消毒剂。对消毒物品的穿透力强，可到达物品深部，可以杀灭大多数病原微生物，包括细菌繁殖体、芽胞、病毒和真菌。气体和液体均有较强杀微生

答：由于环氧乙烷易燃、易爆，且对人有毒，所以必须在密闭的环氧乙烷灭菌器内进行。环氧乙烷灭菌器种类很多，根据不同的用途可分为大、中、小型灭菌容器，大型的容积有数十立方米，中等

答：环氧乙烷不损害灭菌的物品且穿透力很强，故多数不宜用一般方法灭菌的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌。例如，电子仪器、光学仪器、医疗器械、书籍、文件、皮毛、棉、化纤、塑料

答：必须每锅进行工艺监测，每包进行化学监测，每月进行生物监测。

（2） 为什么要进行环氧乙烷灭菌的监测？答：因为环氧乙烷灭菌过程受到许多因素如温度、湿度、浓度、灭菌时间等的影响，稍有不慎都将导致灭菌失败而造成严重的医院感染事故；不同的消毒

答：环氧乙烷灭菌工艺监测每一灭菌周期均应进行，包括：①灭菌设备运行是否正常；②灭菌装载是否合理；③灭菌开始时间、结束时间、灭菌物品的种类及数量、灭菌锅次等都需要记录，操作者

答：化学指示剂监测，监测时将化学指示卡放在灭菌物品中央，指示胶带贴封于包外，根据了解到的灭菌过程中环氧乙烷穿透和分布情况，以及环氧乙烷与镁盐作用生成碱性的氢氧化镁使指示剂

答：生物指示物用枯草杆菌黑色变种芽胞（ATCC 9372），抗力要求为：菌量在5 × 105～5 × 106CFU/片，在环氧乙烷剂量为600mg/L ± 30mg/L，作用温度为54℃± 2℃，相对

答：用枯草杆菌黑色变种芽胞（ATCC 9372）悬液污染到中性滤纸片上，每个菌片上污染芽胞数为：5 × 105～5 × 106个。

答：取出的指示菌片接种于含有复方中和剂的0.5%的葡萄糖肉汤培养基管中培养即可。

答：枯草杆菌黑色变种芽胞（ATCC 9372）在普通营养肉汤内生长良好，适宜生长温度为30～37℃，一般放在35℃普通培养箱内培养即可。

答：生物指示物应在预处理之前放入被灭菌物品内或被灭菌物品的试件内。放置菌片的数量应足够多。根据通常做常规微生物学监测的实践经验，采用以下数量的生物指示物较为适宜：①灭

答：经培养，阳性对照在24小时内有菌生长；监测样品若连续培养观察5天，全部无菌生长，可报告生物指示物培养阴性，灭菌合格。

答：应注意以下两点：①监测中必须设置阳性对照，用阳性菌片做阳性对照，经培养必须为有菌生长；②检测所用微生物指示物必须经卫计委批准，并在有效期内使用。

答：紫外线是由德国科学家里特发现的，紫外线是电磁波谱中波长0.01～0.40μm辐射的总称。紫外线的波长愈短，对人类皮肤危害越大。短波紫外线可穿过真皮，中波则可进入真皮。它分为：

答：①消毒使用的紫外线是C波紫外线，其波长范围是200～275nm，杀菌作用最强的波段是250～270nm，消毒用的紫外线光源必须能够产生辐照值达到国家标准的杀菌紫外线灯；②紫外线杀菌属于纯

答：目前我国使用紫外线消毒主要有以下两类设备：①紫外线消毒灯：有下述几种：普通直管热阴极低压汞紫外线消毒灯；高强度紫外线消毒灯；低臭氧紫外线消毒灯；高臭氧紫外线消毒灯；②紫外线

答：紫外线可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、芽胞、分枝杆菌、病毒、真菌、立克次体和支原体等，凡被上述微生物污染的表面，水和空气均可采用紫外线消毒；由于紫外线辐照能量低，穿

答：单位时间与紫外线传播方向垂直的单位面积上接受到的紫外线能，单位常用μW/cm2。

答：应进行日常监测、紫外线灯管照射强度监测和生物监测。对新的和使用中的紫外线灯管内进行照射强度监测，新灯管的照射强度不得低于100μW/cm2。使用中灯管不得低于70μW/

答：紫外线消毒效果影响因素较多，主要有电源电压、照射距离、空气中相对湿度和洁净度、温度、有机物、物品材料性质等，且紫外线灯具随使用时间的延长其辐射强度在不断衰减，所以进

答：日常监测制度包括每天的灯管使用时间的登记、累计照射时间的统计和使用人签名登记。

答：紫外线灯管照射强度监测有两种方法：①紫外线辐照计测定法：开启紫外线灯5分钟后，将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m的中央处，待仪表稳定后，所

答：因为紫外线灯会随着使用而照射强度下降，所以在使用中定期监测紫外线灯的照射强度是非常重要的。普通30W直管型紫外线灯，新灯辐照强度≥90μW/cm2为合格；使用中紫外线灯辐

答：紫外线生物监测可通过空气消毒效果监测和表面消毒效果监测两个途径进行。

答：紫外线消毒效果监测时，采样液（平板）中不需要加中和剂。

答：有低温蒸汽甲醛气体消毒、环氧乙烷气体灭菌、臭氧、液体化学消毒剂［戊二醛、过氧乙酸、过氧化氢、二溴二甲基乙内酰脲（二溴海因）、二氧化氯、含氯消毒剂、乙醇、碘伏、氯己定

答：①碘伏；②碘酊；③醇类消毒剂；④氯己定制剂；⑤三氯散制剂；⑥季铵盐类消毒剂。

答：①乙醇或异丙醇（醇类）；②碘伏；③氯己定（洗必泰）；④氯己定复方制剂（氯己定醇）；⑤苯扎溴铵（新洁尔灭）；⑥六氯酚。

答：根据消毒灭菌效果分为三类：高效消毒剂、中效消毒剂、低效消毒剂。

答：指可杀灭一切细菌繁殖体（包括分枝杆菌）、病毒、真菌及其孢子等，对细菌芽胞（致病性芽胞菌）也有一定杀灭作用，达到高水平消毒要求的制剂。

答：热力灭菌、环氧乙烷气体、甲醛、戊二醛、含氯消毒剂、过氧乙酸、过氧化氢等。

答：指仅可杀灭分枝杆菌、真菌、病毒及细菌繁殖体等微生物，达到消毒要求的制剂。

答：有碘类消毒剂、醇类消毒剂、酚类消毒剂、紫外线等。

答：指仅可杀灭真菌、病毒及细菌繁殖体等微生物，达到消毒要求的制剂。

答：有氯己定、季铵盐、三氯散等。

答：使用中的消毒剂、灭菌剂：应进行生物和化学监测。①生物监测：消毒剂每季度一次，其细菌含量必须< 100CFU/ml，不得检出致病性微生物；②灭菌剂每月监测一次，不得检出任何微生物；③化

答：消毒剂的浓度易受很多因素的影响，如很多化学消毒剂本身性质不太稳定，随着时间的延长，其浓度会下降。国内已有报道医院因为消毒剂配制的浓度不合要求，导致严重的医院感染爆发事

答：用试纸或指示卡检测化学消毒剂含量，已成为医院进行使用中消毒、灭菌剂浓度监测的常用方法，较之采用化学标定等其他方法测定更方便简易。常用的有G-1型消毒剂浓度试纸，可以应

答：采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。

：去除消毒剂的方法有：①化学中和法：又称中和剂法，是指在消毒剂与微生物作用到达规定时间的终点时，取样加于适宜种类和浓度的中和剂中，将残留消毒剂迅速中和，使其不再持续抑制或杀灭

答：对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于氯己定、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3%（W/

答：一般符合固体加入液体内比例为重量与体积的比例，液体加入液体内为体积与体积的比例。如配制0.3%甘氨酸，则为0.3g的甘氨酸加入到100ml的肉汤中，混匀后灭菌备用。

答：一般中和剂应作用10分钟左右。

答：PBS是磷酸缓冲液的英文缩写。

答：用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1.0ml接种平皿，将冷至40～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15～20ml，36℃&plusmn; 1℃恒温箱培养72小时，计数菌落数；怀疑与医院感染爆

答：菌落形成单位即colony forming unit，简称CFU。在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活菌的数量。

答：不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应指标的检测。

答：使用中灭菌用消毒液：无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10CFU/ml，其他使用中消毒液染菌量≤100CFU/ml。