耐药基因的检测
答:每一类ESBLs,可设计一个通用引物进行PCR检测,实际检测时可以参照部分文献中提供的引物,常用的引物见表5-1-1。PCR体系:50mu;l,其中buffer 5mu;l,dNTP 4mu;l,引物各0.25mu;l,聚......
答:根据其氨基酸序列的同源性,可以将CTX-M 型ESBLs大致分成五组,第一组包括CTX-M-1,-3,-10到-12,-15,-22,-23,-28,-29和CTX-M-30;第二组包括CTX-M-2,-4到-7,-20和Toho-1;第三组包括CTX-M-8......
答:对于表型研究中怀疑或者确认有ESBL的细菌,可以先用每一类ESBLs的通用引物进行PCR扩增,然后选取相应的测序引物(下表)进行PCR扩增及测序,将测序所得序列进行比对后确认其基因型......
答:目前质粒AmpC酶已经有40多种,根据氨基酸的同源性及进化树分析,将其分为六群:来源于枸橼酸杆菌的CIT群;来源于阴沟肠杆菌的EBC群;来源于摩根摩根菌的DHA群;来源于蜂房哈夫尼亚菌......
答:①热裂解提取DNA:取过夜纯培养细菌单一菌落,接种至5ml LB肉汤,37℃过夜培养,取1.5ml菌液转至Eppendorf管,13 200rpm离心5分钟,去上清,在沉淀中加入500micro;l双蒸水,95℃加热10分......
答:质粒AmpC酶目前有40多个型别,对每个型别的PCR检测中,应该注意引物的特异性。自己设计引物需要一定的经验,所以最好是借用已得到公认的文献中的引物。退火温度:不同PCR仪的性能......
答:mecA基因是甲氧西林耐药葡萄球菌(MRS)特有的耐药基因,在其耐药性中起决定性的作用。葡萄球菌检出mecA基因或PBP2a即可定为MRS。PCR通过直接检测细菌染色体上的mecA基因来确证......
答:MRS包括MRSA和MRSCN,多重PCR采用同时检测mecA基因和femA基因,或者mecA基因和凝固酶基因(coa gene),能准确区分MRSA 和MRSCN。所用引物见表5-1-6,反应条件见相关文献。......
答:VRE耐药基因分为VanA、VanB、VanC、VanD、VanE、VanG、VanL、VanM及VanN等型。VanA型可被万古霉素和替考拉宁诱导且对二者高度耐药,VanB型只能由万古霉素诱导对万古霉素耐......
答:①细菌总DNA抽提:将细菌接种在LB液体培养基中,35℃摇床过夜。取1.5ml菌液倒入Eppendorf管中,12 000r/min离心5分钟,弃上清液,用100mu;l裂解液(内含25mu;g溶菌酶)将细菌重悬,混匀......