三、重组DNA分子转化大肠埃希菌

为了提高转化效率，感受态细胞一般作为转化的对象。转化的基本流程见实验流程2-3，其中的关键环节是：①冰上融化感受态细胞，因为感受态细胞经过低渗CaCl2溶液的处理，不仅细胞膜上有钙复合物，而且细胞处于膨胀状态，低温可以最大程度地减少对细胞的机械性损伤。转化DNA的同时加入了DMSO或β-巯基乙醇(也可以在感受态细胞冻存前加入),这是因为DMSO或β-巯基乙醇能增强细胞膜对渗透压和细胞皱缩的耐受性，使其更稳定（如果感受态细胞冻存前加入，还可增强细胞膜在融化时的稳定性，并保护感受态细胞免受冰晶的损伤）。 ......