退火(annealing).每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板,循环往复,经过n轮循环后,靶DNA的拷贝数理论上呈2n增长。固相锚定PCR是利用偶合于一固相基质上的特异性寡核苷酸链作为引物合成cDNA,从而使合成的cDNA与固相基质以共价键相结合。用oligo(dT)为引物合成的附着于固相基质上的cDNA包含了与一个cDNA文库相似的序列信息,因此也称为固相文库。由于cDNA结合在固相基质上,所以在PCR过程中改变缓冲液条件或引物组成十分方便,只需洗涤固相基质,然后将其重悬于不同的PCR反应混合液 ......