[概述]三、胚胎干细胞系的建立

在胚胎多潜能干细胞分离培养过程中，必须满足两个条件：其一是促进ICM细胞或PGC细胞的增殖。其二是抑制ICM细胞或PGC细胞的分化。前者可通过设计合理的培养基配方来实现，后者需从胚胎的胚龄和分化抑制选择方面加以考虑。适宜的体外培养系统是ES细胞建系、传代培养的关键。一般使用小鼠囊胚及囊胚ICM，建系成功率为9%，使用延迟囊胚，成功率30%。已经证明小鼠4～6d龄的延迟囊胚，3.5d龄的囊胚或2.5d龄的16～20细胞桑葚胚。当ICM和ES集落足够大时应采用酶消化法和／或机械法将其分散为细胞团块或单个细胞（ ......