采用原位灌流法分离8~10kg重的成年猪肝细胞。10min后取肝脏置于0.1%Ⅳ胶原酶溶液中(含钙),并以同样的速度循环灌注肝脏,30min后撕裂肝包膜,剔除肝纤维结缔组织,游离肝细胞并用100 μ m尼龙网过滤。过夜培养的肝细胞活性无明显变化,大于75%的肝细胞黏附于微载体上,过夜黏附培养后的肝细胞被立即放入中空纤维型生物反应器外腔使用。 ......