RT-PCR方法扩增人的OCT3 / 4 ORF基因,并克隆到pCR2.1-TOPO载体,将pCR2.1-hOCT3 / 4 EcoR Ⅰ酶切片段连接到pMXs反转录病毒载体的EcoR Ⅰ位点。为了区别每次试验,在OCt3 / 4表达载体的Not Ⅰ / Sal Ⅰ位点,插入20bp随机序列,这个独特的N20条形码可防止试验之间的污染。7 .所有的片段需经过测序进一步验证。 ......