一、DNA 序列分析的原理和策略

Maxam Gilbert化学降解法（简称化学法）由Maxam和Gilbert于1977年创立，其机制是把5 ′末端标记的DNA用专一的化学试剂分别对四种碱基进行修饰，使相应的糖苷键因不稳定而断裂，得到以特定碱基为3 ′末端的四组片段。这些片段随后用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再经过放射自显影，即可直接读出核苷酸的序列。这项技术一般可以测出距离标记位点250个核苷酸以内的DNA序列。其中硫酸二甲酯破坏嘌呤，它能使鸟嘌呤甲基化。甲基化的嘌呤脱落，在碱性条件下加热已脱嘌呤的DNA，磷酸二酯键就会断裂。胞嘧啶（C） ......