进行亲和层析,一是要有一个固相支持载体(matrix),二是(也是最重要的)要选择一个能与被分离的生物大分子有基团特异性(group‐specificity)或共价耦联(covalent coupling)作用的相应配基(ligand),然后将配基耦联到固相载体上,制成亲和凝胶柱。进而分离混合物中能与配基结合的生物分子,未结合组分通过亲和柱,结合物借助改变洗脱条件自亲和柱上解吸下来。例如用生物素蛋白作配基纯化含少量生物素的羧化酶时,生物素‐抗生物素蛋白的解离常数pk ≥ 15,只有在6M盐酸胍(p H = ......