免疫荧光标记过程中的各种影响因素如细胞类型、活力、细胞和试剂浓度、时间、温度、缓冲液或标记物,必须评估以获得最佳和可重复性结果。处理细胞应该轻柔,采用尽量少的步骤,以减少对细胞的损害,避免降低细胞的活力、特殊细胞类型的丧失以及遗留细胞中人为表达的抗原。针对Fc受体的特异性阻断抗体可以替代BSA。由于死细胞影响染色、分析和分选,所以在染色之前应该通过离心除去死细胞。一种特异性良好的对照是用可溶性靶分子阻断亲和标记物的染色,也可以用未标记的亲和试剂和对照蛋白质结合阻断染色,这种对照只用于直接染色或半抗原亲和试 ......