[辅助检查]六、重组载体的构建

根据不同的实验研究目的选择不同的载体。如λ噬菌体和黏粒适用于构建基因组文库，p UC系列等质粒适合构建cDNA文库和克隆一些较小的DNA片段，M13噬菌体则用于克隆一些待测定的DNA片段。针对这一问题，往往需要在连接前将线性DNA分子进行5 ′端去磷酸化处理，除去5 ′端磷酸基团。如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用，用不同的限制性内切酶切割后的黏性末端不能互补结合，则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端，再用T4DNA连接酶连接。然而平末端连接同样也有其缺陷之处：一是平末端 ......