方案二 全细胞蛋白质双向凝胶电泳结合MALDI-TOF PMF蛋白质组分析方法

细菌生长到对数中期, 3000g 4℃离心5min收集菌体（可根据具体情况调整），预冷PBS（加入终浓度0.5mg/ml蛋白酶抑制剂cocktail）洗涤两次。在进行双向凝胶电泳样品制备时,为了保证样品裂解的完全，一般将超声裂解时间延长至1h。蛋白抽提样品使用Bradford assay测定蛋白含量并进行单向凝胶电泳进行质量检测。2的多肽作为候选进一步通过与双向凝胶电泳实验获得的Mr和pI数据进行比较分析。胶上每一个蛋白质点的pI和Mr的确定,需要以一个双向凝胶电泳结果已经分析完全的蛋白质样品进行对照获得 ......